Биологиялық зерттеулерде әдетте ұзын ретті полипептидтер қолданылады.Ретінде 60-тан астам аминқышқылдары бар пептидтер үшін оларды алу үшін әдетте ген экспрессиясы және SDS-PAGE қолданылады.Дегенмен, бұл әдіс ұзақ уақыт алады және соңғы өнімді бөлу әсері жақсы емес.
Ұзақ пептидтер синтезінің қиындықтары мен шешімдері
Ұзын пептидтердің синтезінде біз әрқашан мәселеге тап боламыз, яғни конденсация реакциясының стерикалық кедергісі синтездегі реттілік жоғарылаған сайын артады және реакцияның аяқталуы үшін реакция уақытын реттеу қажет.Дегенмен, реакция уақыты неғұрлым ұзақ болса, соғұрлым жанама әсерлер пайда болады және мақсатты пептидтің бір бөлігі түзіледі.Мұндай қалдықтар – жетіспейтін пептидтік тізбектер ұзақ пептидтік синтезде түзілетін негізгі қоспалар болып табылады.Сондықтан ұзақ пептид синтезінде аминқышқылдарының конденсациялану реакциясын жан-жақты және толық ету үшін жоғары сапалы реакция жағдайлары мен реакция әдістерін зерттеу біз шешуге тиіс негізгі мәселе болып табылады.Сонымен қатар, реакция уақытын азайтыңыз, өйткені реакция уақыты неғұрлым ұзақ болса, соғұрлым бақыланбайтын жанама реакциялар соғұрлым күрделі болады, жанама өнімдер соғұрлым күрделі болады.Осылайша, келесі үш тармақ қорытындыланады:
Микротолқынды синтезді қолдануға болады: Синтез процесінде кездесетін кейбір аминқышқылдары үшін біріктіру оңай емес, микротолқынды синтезді қолдануға болады.Бұл әдіс керемет нәтижелерге ие және реакция уақытын айтарлықтай қысқартады және екі негізгі жанама өнімнің түзілуін азайтады.
Фрагменттерді синтездеу әдісін қолдануға болады: Кейбір пептидтерді жалпы синтез әдістерімен синтездеу қиын және тазарту оңай болмаса, біз пептидтің белгілі бір сегментіндегі бірнеше аминқышқылдарының тұтас конденсациясын тұтастай пептидтік тізбекке қабылдай аламыз.Бұл әдіс синтездегі көптеген мәселелерді де шеше алады.
Ацилгидразид синтезін қолдануға болады: пептидтердің ацилгидразидті синтезі - бұл пептидтік байланыс әдісіне жету үшін амидтік байланыстардың түзілуі арасындағы N-терминал Cys пептидінің және C-терминалды полипептид гидразидінің химиялық селективті реакциясының қатты фазалық синтезінің әдісі.Пептидтік тізбектегі Cys орнына негізделген бұл әдіс бүкіл пептидтік тізбекті бірнеше реттілікке бөледі және оларды сәйкесінше синтездейді.Соңында мақсатты пептид сұйық фазалық конденсация реакциясы арқылы алынады.Бұл әдіс ұзақ пептидтің синтез уақытын айтарлықтай қысқартып қана қоймайды, сонымен қатар соңғы өнімнің тазалығын айтарлықтай арттырады.
Ұзақ пептидті тазарту
Ұзын пептидтердің ерекшелігі сөзсіз шикі пептидтердің күрделі компоненттеріне әкеледі.Сондықтан ұзақ пептидтерді HPLC арқылы тазарту да қиын.полипептидтерді тазарту процесінің амилоидты сериясы, көп тәжірибені сіңіреді және ұзақ пептидті тазартуда сәтті қолданылады.Жаңа жабдықты қабылдау, бірнеше тазарту жүйелерін араластыру, қайталанатын бөлу және басқа тәжірибе әдістерін қолдану арқылы ұзақ пептидті тазартудың сәтті жылдамдығы айтарлықтай жақсарды.
Жіберу уақыты: 18 сәуір 2023 ж