Тіршілік процестерінде маңызды рөл атқарады, пептидтерде орналасқан Tyrr, Ser, Thr-ды фосфорлайды.Фосфорланған аминқышқылы қазіргі уақытта жалғыз фенилфосфорланған аминқышқылдарында қолданылатын фосфор қышқылының пептидтерін өндіруде жиі қолданылады.HBTU/фосфорланған амин қышқылдары әдетте фосфорланған амин қышқылдарын HOBt/DIEA әдісімен байланыстыру үшін пайдаланылады, бірақ фосфор қышқылының пептидтері осы тәсілдің ақауларын таңдайды, әсіресе генерацияланған әлдеқайда ұзағырақ пептидті пептидтерде немесе аминқышқылды фосфатта тиімділік төмен, төмен. соңғы өнімнің тазалығы.Бұл фосфопептид үшін біз таңдамалы постфосфорлану тәсілін қарастырдық.Генерация процесі - бұл пептидтер синтезінен кейін таңбалануы қажет аминқышқылдарының бүйірлік тізбегі қорғаныс топтарын таңдап алу.Tyr үшін Thr қорғалмаған бүйірлік тізбектері бар амин қышқылдары арқылы тікелей әрекеттесе алады.-Ser (trt), 1% TFA /DCM ортасында сандық түрде жойылады.
Фосфорлану, қос бензол фосфитпен фосфорамид және төрт азот түзіледі және фосфорамид тетразолийдің белсенді аралық өнімдері, гидроксимен байланысады, содан кейін қышқылдық пероксидпен тотығу кезінде фосфор түзіледі, толық реакция.
Қазіргі уақытта пептидті фосфорланған модификация әдісінің екі негізгі түрі бар:
(1) полипептидтер тізбегіне орташа кепілдік берілген фосфорланған аминқышқылдарын тікелей енгізу;
(2) пептидтер тізбегінде түзілген шайырдан кейін бүйірлік тізбек гидроксилінің Ser, Tyr немесе Thr фосфорлануына дейін.
1) фосфорланған аминқышқылдары пептидтер тізбегін тікелей енгізеді орташа кепілдік береді:
Яғни, фосфорлануы қажет амин қышқылдары (Thr, Ser немесе Tyr) көмегімен алдын ала фосфорланады және тиісті түрде қорғалады, содан кейін фосфорлану қалыпты SPPS генерациялау процесіне негізделген полипептидтік индексті таңдау нүктесіне дейін тарылады. .Бұл әдіс жұмыс істеуге оңай, пептидтік кәсіпорындардың фосфорланған модификациясының негізгі әдісі болды.
2) пептидтер тізбегінде түзілген шайырдан кейін Ser гидроксифосфорлануына, Тир немесе Thr бүйірлік тізбектеріне:
Полипептидтік әдіске бір рет жиырылуының фосфорлануын қолданып фосфорлану безендіру, бүйірлік тізбекті безендіруде үлкен топтар тудыратын стерикалық кедергіге байланысты аминқышқылдарының фосфорлануының пептидтік тізбекпен қысқаруы қиын.Болашақта амин қышқылдарын енгізу қиынырақ болады, әсіресе бірнеше фосфорлану учаскелері бар безендіруде генерация өте қиын болады, соңғы өнімнің құрамы күрделі, бөлу қиын және өнімділігі өте төмен болады.
Сондықтан пептидтік тізбектегі бірнеше учаскелер фосфорланған кезде, шайырдағы пептидтер тізбегін генерациялауды таңдауға болады, содан кейін оны Ser, Tyr немесе Thr бүйір тізбегі гидроксил тобы арқылы фосфорлайды: оның генерациясы негізінен ферменттердің селективті жойылуын қамтиды. пептидтер синтезінен кейін аминқышқылдарын тануды талап ететін бүйірлік тізбекті қорғау тобы.Tyr үшін, Thr жауап ретінде қорғалмаған аминқышқылдарының бүйірлік тізбектерін тікелей пайдалана алады.
Бүйірлік тізбекті қорғау негізі 1% TFA/DCM ортасы сандық түрде жойылуы мүмкін.Бұл әдіс таңдалған кезде, гидроксил тобымен байланыстырылған дибензилфосфорамидит пен тетразолийдің көмегімен фосфорамидит тетразолийдің белсенді аралық өнімін жасауға болады, содан кейін реакцияны аяқтау үшін пероксиқышқылды ортада фосфорил тобын құру үшін тотықтырылады.
Жіберу уақыты: 08 қыркүйек 2023 ж